
Il sistema di cromatografia liquida ad alte prestazioni consiste di diverse parti, tra cui un serbatoio, pompa, iniettore, colonna cromatografica, rivelatore, registratore, ecc. La fase mobile nel serbatoio viene pompata nel sistema da una pompa ad alta pressione, e la soluzione campione entra nella fase mobile attraverso l'iniettore e viene caricata nella colonna cromatografica (fase stazionaria) dalla fase mobile. A causa dei diversi coefficienti di distribuzione di ciascun componente nella soluzione campione nelle due fasi, quando si muovono l'uno rispetto all'altro nelle due fasi, subiscono ripetuti processi di distribuzione del desorbimento dell'adsorbimento, con conseguenti differenze significative nella loro velocità di movimento. Essi sono separati in singoli componenti e fluiscono fuori dalla colonna in sequenza. Quando passano attraverso il rivelatore, la concentrazione del campione viene convertita in un segnale elettrico e trasmessa al registratore e i dati vengono stampati sotto forma di spettro.
Aree di applicazione:
La cromatografia liquida ad alte prestazioni richiede solo che il campione sia in grado di formare una soluzione, non limitata dalla volatilità del campione, con un'ampia gamma di opzioni di fase mobile e un'ampia varietà di tipi di fase stazionaria. Pertanto, può separare termicamente instabile e non volatile, dissociata e non dissociata, e varie gamme di peso molecolare di sostanze. In combinazione con le tecniche di pretrattamento del campione, l'elevata risoluzione e sensibilità raggiunta dall'HPLC consentono di separare e determinare contemporaneamente sostanze con proprietà simili, consentendo la separazione dei componenti in traccia in fasi complesse. Con lo sviluppo di fasi stazionarie, è possibile raggiungere la loro separazione in condizioni che mantengono pienamente l'attività delle sostanze biochimiche.
HPLC è diventato il metodo più promettente per risolvere i problemi di analisi biochimica. Grazie alla sua alta risoluzione, sensibilità, velocità veloce, colonne cromatografiche riutilizzabili e alla facile raccolta dei componenti degli effluenti, HPLC è ampiamente utilizzato in vari campi come biochimica, analisi alimentare, ricerca farmaceutica, analisi ambientale e analisi inorganica. La combinazione di cromatografia liquida ad alte prestazioni e strumenti strutturali è una direzione di sviluppo importante.