Il disgregatore cellulare ultrasonico DH92-IIN è uno strumento multifunzionale e multifunzionale che utilizza un forte ultrasuono per generare effetto di cavitazione in liquido e trattare sostanze con ultrasuoni. Può essere utilizzato per la frammentazione di varie cellule animali e vegetali, cellule del virus, così come per emulsionazione, separazione, omogeneizzazione, estrazione, defoaming, pulizia e accelerazione delle reazioni chimiche. Ampiamente usato in campi quali biochimica, microbiologia, chimica medica, chimica superficiale, fisica, zoologia, ecc.

◆ Utilizzato per schiacciare cellule animali e vegetali, batteri, spore o tessuti, estrarre proteine dalle cellule e condurre esperimenti scientifici di coltivazione per virus e vaccini.

Accelerare il tasso di reazione della chimica, della fisica, ecc. e accelerare il degassamento dei liquidi.

Analisi di ricerca sulla diluizione del petrolio greggio, emulsionazione olio-acqua, de cristallizzazione accelerata e omogeneizzazione del vetro.

◆ Disporre terre rare, vari minerali inorganici e preparare una miscela omogeneizzata di particelle di lattice con una concentrazione di quasi 1/100 nanometro.

Soluzione di pulizia rapida e potente ad alta precisione per micro fori e fori ciechi negli stampi.

Scopo sperimentale

1. Comprendere i principi di base della lisi cellulare ultrasonica

2. Padroneggiare le tecniche di base della lisi cellulare ultrasonica

Principio sperimentale

Quando forti onde sonore agiscono su una soluzione, il fenomeno di cavitazione della generazione di bolle, crescita e frammentazione è correlato. L'onda d'urto e la forza di taglio causate dalla cavitazione causano lisi cellulare.

Materiali e reagenti

Batteri 10ml, becher, ghiaccio rasato, batuffolo di cotone alcolico 75%.

Metodi di lisi cellulare:

1,Metodo di frammentazione meccanica: si riferisce all'uso di frantoi, smerigliatrici, omogeneizzatori, ecc per abbattere le cellule.

1. schiacciamento dell'organizzazione ad alta velocità: Mescolare il materiale in una pasta sottile come liquido, metterlo in un cilindro con circa 1/3 volume, coprire saldamente il cilindro, girare il regolatore di velocità nella posizione più lenta prima, accendere l'interruttore e accelerare gradualmente alla velocità desiderata. Questo metodo è applicabile ai tessuti viscerali animali, ai semi carnosi delle piante, ecc.

2. Omogenizzazione dell'omogeneizzatore di vetro: In primo luogo, posizionare il tessuto triturato in un tubo, quindi inserirlo in una barretta di macinazione e macinarlo avanti e indietro. Spostarlo su e giù per schiacciare le cellule. Questo metodo ha un grado più elevato di frammentazione cellulare rispetto ai frantoi di tessuto ad alta velocità ed è adatto per piccole quantità e tessuti di organi animali.

2,Metodo di frammentazione fisica: si riferisce all'uso di temperatura, pressione, o onde ultrasoniche per rompere le cellule a parte.

1: Trattare la sospensione cellulare con ultrasuoni di un certo potere per causare scosse rapide e rottura delle cellule (rompere le pareti cellulari e gli organi con la forza di vibrazione di ultrasuoni).

Meccanismo: Può essere correlato al fenomeno di cavitazione causato dalla generazione, crescita e frammentazione delle bolle quando forti onde sonore agiscono sulla soluzione. L'onda d'urto e la forza di taglio causati dalla cavitazione causano lisi cellulare.

L'efficienza della frammentazione ultrasonica dipende da fattori quali frequenza sonora, energia acustica, tempo di elaborazione, concentrazione cellulare e tipo di cella. (Prestare attenzione al raffreddamento durante l'uso per prevenire il surriscaldamento).

2. frammentazione ad alta pressione: La sospensione della cella è spruzzata dallo spazio anulare della camera ad alta pressione sull'anello di impatto stazionario ed è costretta a cambiare direzione e fluire fuori attraverso il tubo di uscita. Durante questo processo, le celle subiscono collisioni di taglio ad alta velocità e cambiamenti da alta pressione a pressione normale, scomponendo e rilasciando il loro contenuto.

Questo è un metodo ideale per abbattere delicatamente e accuratamente le cellule.

3. metodo di congelamento-scongelamento ripetuto: congelare le cellule sotto -20 gradi Celsius, scongelare a temperatura ambiente, ripetere più volte. A causa della formazione di particelle di ghiaccio all'interno delle cellule e l'aumento della concentrazione di sale nel liquido cellulare rimanente, si verifica gonfiore, causando la struttura cellulare per rompere.

3,Metodo di frammentazione chimica: si riferisce all'uso di solventi organici o tensioattivi come formaldeide e acetone per agire sulla membrana cellulare, causando la struttura della membrana cellulare per essere danneggiato o la permeabilità al cambiamento.

Alcune cellule animali, come le cellule tumorali, possono essere interrotte dalle membrane cellulari utilizzando sodio dodecil solfato (SDS), sodio deossicolato e altri agenti. La concentrazione è generalmente di 1mg/ml.

4,Metodo di frammentazione enzimatica: Selezionare gli enzimi appropriati per distruggere la parete cellulare, e poi abbattere i protoplasti in una soluzione ipotonica.

Le pareti cellulari batteriche sono più spesse e possono essere trattate con lisozima per risultati migliori.

Formula standard per la soluzione di cracking: 50mM Tris HCl (pH 8.5-9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml lisozima. Il lisozima funziona meglio all'interno di questo intervallo di pH.

Descrizione completa: Indipendentemente dal metodo utilizzato per schiacciare le cellule tissutali, rilascerà proteine intracellulari o enzimi idrolitici dell'acido nucleico nella soluzione, causando la biodegradazione di grandi molecole e riducendo la massa di sostanze naturali. L'aggiunta di diisopropilfluorofosfato (DFP) può inibire o rallentare l'autolisi; L'aggiunta di acido iodoacetico può inibire l'attività degli enzimi proteolitici che richiedono gruppi idrofobi nei loro centri attivi. L'aggiunta di fluoruro di fenilsulfonile (PMSF) può anche rimuovere l'attività degli enzimi proteolitici, ma non tutti, e dovrebbe essere aggiunto più volte durante la frantumazione; Inoltre, è possibile selezionare pH, temperatura o forza ionica per rendere queste condizioni adatte all'estrazione della sostanza bersaglio.

Precauzioni prima dell'uso:

1. Selezionare una sonda appropriata in base al volume del campione da elaborare e pulire la sonda con un batuffolo di cotone alcolico prima e dopo l'uso. Per sostituire la sonda, utilizzare una chiave specializzata;

Quando la manopola AMPLITUDE è accesa, la sonda non deve essere esposta all'aria e in circostanze speciali (sonda di prova), non deve superare i 10 secondi;

3. Preparare una scatola di ghiaccio prima dell'uso e il campione deve essere messo in un bagno di ghiaccio durante la lavorazione. La concentrazione del campione non dovrebbe essere troppo alta.